胚胎植入之比較

以超音波監控胚胎植入vs. 不用超音波監控胚胎植入

超音波監控植入: 距fundus 1-1.5 cm, ET內管深入6.5cm
不用超音波監控植入: 內管深入6cm

結果: 懷孕率並無差異
http://humrep.oxfordjournals.org/content/22/5/1327.full

高齡產婦比年輕產婦更易合併高危險妊娠

高齡產婦比年輕產婦更易合併高危險妊娠，
包括: 妊娠高血壓，糖尿病，早產，胎兒死亡，剖腹產，產後出血

http://humrep.oxfordjournals.org/content/22/5/1264.full

ICSI造成胚胎染色體間基因片段異常置換

精蟲顯微注射(ICSI)可能造成胚胎染色體間基因片段異常置換

Figure 1.

Partial karyotypes of father (lymphocytes) and fetus (amniotic cells) showing a complex balanced translocation involving chromosomes 1, 4 and 11. (A) R-banded (RHG) karyotype of fetus; (B) high-resolution chromosomal R (RBG) banding of father; (C) High-resolution chromosomal G (GTBG) banding of father.

http://humrep.oxfordjournals.org/content/22/5/1292.full

陰道黃體素比口服黃體素更有效改善子宮內膜環境

病理切片顯示，陰道投藥黃體素比口服黃體素更有效改善子宮內膜環境

http://humrep.oxfordjournals.org/content/22/5/1260.full

使用metformin或避孕藥於多囊性卵巢之比較

使用metformin (glucophage) 或避孕藥(pill)於多囊性卵巢之比較
pill較有效於改善月經異常及減少男性賀爾蒙
metformin 較有效於改善空腹胰島素及三甘油脂，
二者對於血糖及膽固醇之作用類似
http://humrep.oxfordjournals.org/content/22/5/1200.full

OHSS可將2PN胚胎冷凍於下週期再植入

卵巢過度刺激(OHSS)之病人可使用GnRHa誘導排卵，取卵後先將2PN胚胎冷凍，於下一週期再植入，可達到30%以上懷孕率

http://humrep.oxfordjournals.org/content/22/5/1348.long

取卵，卵子培養，受孕，胚胎植入

取卵，卵子培養，受孕，胚胎植入

http://www.kinderwunschzentrumwiesbaden.de/de/filme/sequenz7.swf
http://www.kinderwunschzentrumwiesbaden.de/en/moeglichkeiten/in_vitro_fertilisation.php

男性結紥圖解

http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/presentations/100106_1.htm

精蟲分離

精液滲透壓>300 or >340, 精液分離液<300
造成精蟲osmotic shock(精蟲活動由shaky--->highly progessive pattern)

Percoll 組成為Silicon外面包覆PVP，原廠建議不使用於臨床
但ICSI過程亦使用PVP，

http://www.gfmer.ch/Presentations_En/Pdf/Percoll_swimup.pdf

使用Flow cytometry分離精蟲

使用Flow cytometry分離精蟲
根據精蟲DNA含量與螢光訊號來分離精蟲
此法使用於畜產業可精確分離XY精蟲

http://www.jstage.jst.go.jp/article/jrd/53/1/27/_pdf

以不同濃度分層液分離精蟲

以不同濃度之分層液(40%-50%-60%-70%-80%)分離精蟲
再以FISH染色確認
X精蟲較重分離至80%底層，Y精蟲較輕分布在40%頂層

http://www.jstage.jst.go.jp/article/jrd/50/4/463/_pdf

以12層不同濃度之分層液分離精蟲

以12層不同濃度之分層液分離精蟲

分離前Y精蟲占49%
分離後底層Y精蟲占10%

精蟲分離原理

以不同濃度之分層液(50%-60%-70%-80%-90%)分離精蟲
X精蟲較重，分離在底層80%-90%
Y精蟲較輕，分離在上層50%-60%

http://www.in-gender.com/Gender-Selection/Ericsson/Percoll.aspx

精蟲處理方法比較

上游法可取得數量較少，速度較快, 活動力比率較高, 形態正常比率較高之精蟲
分層離心法可取得較多精蟲 但速度較慢，形態品質較差
清洗法可取得最多精蟲，但品質好壞並無分離
精蟲處理方法之選擇必須視病人精蟲品質決定

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/1315792

IVF精蟲處理方法比較

試管嬰兒IVF精蟲處理方法比較
使用清洗一次後傳統分層法vs.直接清洗兩次後再做精蟲顯微注射結果並無差異

http://humrep.oxfordjournals.org/content/12/9/1980.full.pdf+html

睪丸切片或副睪取精側面圖

睪丸切片(TESE)或副睪取精(MESA)側面圖

http://www.kinderwunschzentrumwiesbaden.de/en/moeglichkeiten/mesa_tese.php

zoom

Spermiengewinnung aus Hodengewebe

無精症

阻塞性無精症
副睪近輸精管處精蟲較成熟&數量較多
精蟲濃度可達100萬/ml

非阻塞性無精症
精蟲活動力較低&常不動
需幾小時培養後活動力較為提高
http://www.maleinfertility.org/new-retrieval4.html

睪丸副睪取精種類

MESA: 傳統微小傷口副睪取精
PESA :  以頭皮針直接副睪取精
TESA :  以23號針刺直接睪丸取精
TESE :  傳統開刀睪丸取精

http://www.glowm.com/?p=glowm.cml/section_view&articleid=334

男性不孕症治療中女性年齡及卵巢功能直接影響懷孕率

在男性不孕症之治療中，女性之年齡及卵巢功能直接影響懷孕率 (< 37歲 vs >37歲 =42% vs 12%)

http://humrep.oxfordjournals.org/content/12/12/2693.long

無精症施行副睪取精(PESA)可取代大部份傳統副睪取精(MESA)

無精症以頭皮針施行副睪取精(PESA)，可以取代大部份傳統開放性傷口之副睪取精(MESA)
取得精蟲再施行ICSI，可得到42%之懷孕率

http://humrep.oxfordjournals.org/content/13/3/620.long

男性精蟲品質越差，精蟲染色體異常之機率越高

男性精蟲品質越差(數量越少，活動力月差，畸形比率過高)，精蟲染色體異常之機率越高
這些病人之精蟲施行ICSI之結果可能會增加胚胎染色體異常之機率，造成懷孕率下降

http://humrep.oxfordjournals.org/content/15/10/2165.long

大部分阻塞性無精症可用MESA取得精蟲

大部分(93%)阻塞性無精症之病患可用副睪取精(MESA)取得高濃度精蟲(40.9×10⁶ spermatozoa/ml)
進一步亦可冷凍儲存於冷凍麥管
解凍後施行ICSI亦可取得42%懷孕率

http://humrep.oxfordjournals.org/content/15/12/2531.long

先天無輸精管病患常併有精蟲分化基因異常

先天無輸精管之病患約有12%並有精蟲分化基因異常
先天無輸精管之病患於治療前應考慮進行基因諮詢篩檢，包括cystic fibrosis, Y chromosome microdeletions,  karyotype abnormalities.


http://humrep.oxfordjournals.org/content/16/3/529.long

無精症精蟲冷凍後與新鮮精蟲卵子受孕率及懷孕率相近

無精症病患以TESE 或 MESA取出之精蟲冷凍後施行ICSI與新鮮之精蟲卵子受孕率 (60 vs 54%)及懷孕率 (27 vs 27%)相近

Open epididymal sperm aspiration (OESA): 微小傷口MESA

Open epididymal sperm aspiration (OESA) 屬於微小傷口之MESA，副睪附近切一道<1cm刀口

找到副睪 以18號針頭抽取
若無法找到精蟲，直接以同一刀口施行睪丸取精(TESE)
施行ICSI後，OESA懷孕率較TESE為高 (27 vs 7%)

http://www.arch-espanoles-de-urologia.es/apartados/sumarios/popup.php?&ano=2006&id=59-03-21

輸精管結紥後無精症之處置

輸精管結紥後無精症之病患施行輸精管重接手術之比施行睪丸(TESE, TESA)或副睪(MESA)取精成功率為低&花費較高
輸精管結紥後無精症之病患施行輸精管重接手術之接通率約為70%
http://humrep.oxfordjournals.org/content/23/9/2043.long

無精症之取精法(TESE, TESA, MESA, PESA)

無精症之取精法分: TESE, TESA, MESA, PESA

取精後施行ICSI，ICSI後懷孕率與無精症之成因有關

阻塞性無精症之懷孕率較非阻塞性無精症為高 (50 vs 30%)

http://www.brazjurol.com.br/september_october_2011/Esteves_570_583.htm

不成熟卵子體外培養中添加臍帶血可達到較高懷孕率

不成熟卵子體外培養(IVM)培養液中添加20%臍帶血血清，比添加20%濾泡液可達到較高之成熟率(94 vs 77%)，較好的胚胎比率(50 vs 24%)，較高的懷孕率(40% vs 23%)

Arch Androl. 2007 Nov-Dec;53(6):303-7.

玻尿酸篩選精蟲方法與教學

玻尿酸(hyaluronan hydrogel. Hyaluronan)篩選精蟲方法與教學
http://art.biocoat.com/products.htm

PICSITM Sperm Selection Device Biocoat's PICSI Sperm Selection Device offers significant advantages in selecting sperm for the ICSI (Intra Cytoplasmic Sperm Injection) method of in vitro fertilization.

精蟲表面HspA可與玻尿酸(hyaluronic acid)結合用以篩選健康成熟精蟲

用玻尿酸(hyaluronic acid)篩選健康成熟精蟲之方法，其內部機轉可能牽涉到

精蟲表面之 HspA2 (previously creatine kinase M isoform)，可與hyaluronic acid結合

http://www.rbmojournal.com/article/S1472-6483(10)61060-7/abstract

Polscope(極體顯微鏡)於生殖醫學之應用

1. Polscope於ICSI前評估紡錘體(spindle)位置可提高ICSI之成功率 。
2. Polscope可評估MII卵子之品質及IVF或ICSI之預後 。
3. Polscope可觀測玻璃化冷凍及解凍後卵子紡錘體外型來評估卵子品質 。
4. Polscope可觀測複製動物中胚胎去核及核移植後之胚胎紡錘體狀況 。
5. Polscope應用於複製動物中胚胎去除紡錘體可提高胚胎移植成功率 。
6. 打HCG38小時後 卵子紡錘體比打HCG38小時內之紡錘體較明顯&ICSI 應於打HCG38小時後施行 。
7. Polscope除可觀察紡錘體(spindle)還可觀查細胞內之胞器與微小管及中空透明帶之結構。

http://www.midatlanticdiagnostics.com/documentation/pdf/oosight/PS_Refs_082506.pdf

胚胎玻璃化冷凍解凍植入之懷孕率比 新鮮胚胎植入之懷孕率還高

本篇指出，將所有第3天胚胎玻璃化冷凍後於往後週期再解凍植入之懷孕率(53%)比不冷凍直接將第3天新鮮胚胎植入之懷孕率(33%)還高。
冷凍解凍胚胎存活率為98%。
新鮮週期之高E2值可能抑制LH及子宮內膜之接受度。

http://xbyx.xysm.net/xbwk/fileup/PDF/201007673.pdf

原核移殖，冷凍與電融合後孤雌生殖分裂

將原核(germinal vesicle )之細胞核取出至移入去核之卵細胞中 再予以電融合後施行孤雌生殖分裂。
原核之細胞核亦可玻璃化冷凍儲存於去細胞質之中空透明帶(Zona pellucidae)中。
經冷凍解凍之原核可達到類似新鮮原核之生殖分裂。

http://www.jstage.jst.go.jp/article/jrd/57/3/335/_pdf

胚葉細胞可用於生殖細胞之培養與再生

胚葉細胞可用於生殖細胞之培養與再生
胚葉細胞移植入囊胚細胞之生殖細胞脊處以進一步分化為生殖細胞
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21302258

玻璃化冷凍法應用於血球細胞之保存

玻璃化冷凍法可應用於血球細胞之保存
應用微滴噴灑技術 可以玻璃化冷凍法有效保存血球細胞


http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3055869/?tool=pubmed

子宮內膜之環境對維持胚胎基因穩定性有相當作用

子宮內膜之環境對維持胚胎基因之穩定性亦有相當作用

解凍後卵子使用IVF與使用ICSI 卵子受孕率相近


http://www.plosone.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.pone.0021597

卵巢組織抽取原始濾泡以冷凍培養

癌症病患切取卵巢組織 & 自卵巢抽取出原始濾泡
經24-48小時IVM培養後予以冷凍
取出卵子中82%是GV, 17%是MI, 1%是MII卵子
IVM培養液中含有75 mIU/ml FSH & 75 mIU/ml LH
月經周期&是否吃避孕藥對於IVM卵子取出率並無影響
最終可培養出30%之成熟卵子
http://www.rbej.com/content/9/1/150

第3天或第5天胚胎植入累積懷孕率統計結果並無差別

第3天或第5天胚胎植入累積懷孕率統計結果並無差別，其選擇性在於:  臨床醫師判斷 病人胚胎數量 第3天品質狀況 實驗室培養環境之穩定性 本研究中亦顯示第3天或第5天冷凍解凍胚胎累積懷孕率統計結果並無明顯差別 http://www.rbej.com/content/9/1/60

封閉式麥管玻璃化冷凍儲存胚胎與傳統玻璃化冷凍方法類似之存活率類似

使用封閉式麥管方式玻璃化冷凍儲存胚胎之方法提供與傳統玻璃化冷凍方法類似之存活率，同時其更簡便更容易操作學習
http://www.jstage.jst.go.jp/article/jrd/57/4/437/_pdf

玻璃化冷凍法比慢速冷凍法更能提高不成熟卵子之存活率與受孕率

玻璃化冷凍法比傳統慢速冷凍法更能提高不成熟卵子之存活率與受孕率
不成熟卵子比成熟卵子更能抵抗冷凍過程對細包染色體，紡垂絲與微小管之傷害
http://www.rbej.com/content/pdf/1477-7827-9-156.pdf

玻尿酸篩選精蟲顯微注射(HA-ICSI)可提高胚胎品質與著床率

使用玻尿酸篩選精蟲&精蟲顯微注射(HA-ICSI)

比較

傳統PVP篩選精蟲&精蟲顯微注射(PVP-ICSI)

可提高之胚胎品質與著床率

swim-up精蟲分離法可減少精蟲染色體異常及精蟲不成熟之比率

精蟲分離法中常用的上游法(swim-up)
可減少精蟲染色體異常之機率及精蟲不成熟之比率

http://humrep.oxfordjournals.org/content/18/7/1481.long

使用PICSI(玻尿酸)挑選精蟲可挑選出DNA較正常之精蟲進行ICSI 而提高胚胎之正常率與著床率

與玻尿酸結合之精蟲DNA完整性較高

圍繞玻尿酸(PICSI)之精重顯示99%DNA正常完整性(綠色)

使用PICSI挑選精蟲可挑選出DNA較正常之精蟲進行ICSI 而提高胚胎之正常率與著床率
http://www.andrologyjournal.org/cgi/content/full/31/6/566

精蟲穿透檢驗(SPA)與IVF多重受精有關

精蟲穿透檢驗(sperm penetration assay, SPA): 運用倉鼠hamster卵子與精蟲培養看精蟲穿透卵子之比例
SPA之正常與否與精卵體外受孕(IVF)是否多重受精有關
正常SPA之病患亦較異常SPA之病患懷孕率為高，流產率為低

卵巢功能衰退之高齡病患補充DHEA可明顯提高卵子胚胎數量及提高懷孕率

研究顯示，針對卵巢功能衰退之高齡病患，補充DHEA可明顯提高卵子與胚胎數量
進而提高累積懷孕率

(these data suggest that DHEA supplementation may be effective in improving pregnancy chances in women with DOR. )

試管嬰兒體外培養過程污染之可能原因為精液造成之感染

試管嬰兒體外培養中，造成培養過程污染之可能原因為精液造成之感染

以 Percoll 離心之方式分離精蟲並無法完全防止感染之發生

柔沛(Finasteride)可能造成精蟲DNA受損

柔沛(Finasteride)可能造成精蟲DNA受損，DNA fragmentation index上升，進而造成精蟲受孕率下降
停止服用柔沛，精蟲DNA受損情況逐漸改善

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21292254

柔沛(Finasteride)造成精蟲數量，濃度，容量，活動力下降

柔沛 (學名為Finasteride)用於治療男性雄性禿，每天口服一毫克，



柔沛副作用包括性欲下降、勃起障礙及射精障礙等，停藥後副作用消失。



柔沛是一種5α還原脢抑制劑(5α-reductase inhibitor)，可減少二氫睪固酮（dihydrotestosterone, ＤＨＴ）產生，ＤＨＴ太多，毛囊會萎縮而掉髮。


本研究顯示: 柔沛(Finasteride)造成精蟲數量，濃度，容量，活動力下降，但對精蟲外型無明顯影響


值得注意的是長期服用柔沛之病患，停藥後2年後，仍有相當比例病患之精蟲品質無法完全恢復服藥前精蟲之品質

http://jcem.endojournals.org/content/92/5/1659.long

Kitazato vitrification 教學

Kitazato vitrification protocol:
Embryo vitrificaiton: http://www.kitazato-biopharma.com/cryotop/protocol_embryo.html
Oocyte vitrification: http://www.kitazato-biopharma.com/cryotop/protocol_oocyte.html

microtubules與cytoskeleton機能異常與卵子細胞老化有關

A: mouse
B: human

oocyte成熟歷經
prophase (germinal vesicle stage)
Meiosis I (MI)
Meiosis II (MII, 排出第一極體)
Fertilization (受孕, 排出第二極體)


紡錘體(spindle)之移動仰賴細胞質內微小管(microtubules)與細胞骨架(cytoskeleton)之正常運作

於MII階段, microtubules與cytoskeleton將spindle固定於第一極體旁之細胞膜

microtubules與cytoskeleton機能異常與卵子細胞老化有關

紡錘體出現較多在打完破卵針後38-39小時及紡錘體出現後再施打ICSI可得到較高之胚胎受孕率

http://humrep.oxfordjournals.org/content/19/3/649.long
本篇提出紡錘體出現的時間約較多在打完破卵針後38-39小時
polscope(偏光顯微鏡)比傳統觀查第一極體之排出更能準確評估卵子之成熟性
polscope(偏光顯微鏡)可避免精蟲顯微注射(ICSI)傷害紡垂體
紡錘體出現後再施打ICSI可得到較高之胚胎受孕率
同時為避免精蟲顯微注射(ICSI)傷害紡垂體，作者是出提出是否考慮將ICSI延至打完破卵針後38-42小時

HIV(愛滋)病毒可經由精蟲垂直傳染至授精的卵子細胞中

本研究顯示HIV(愛滋)病毒可經由精蟲垂直傳染至授精的卵子細胞中
使用人類HIV精蟲可受孕傳染HIV病毒至倉鼠卵細胞中並以Fluorescence In situ Hybridization (FISH)偵測其表現(Fig A,C)


http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3237474/?tool=pubmed

精蟲螢光染色DNA檢驗(Sperm DNA Fragmentation Assay)

http://www.elcaminourology.com/files/SDFA.pdf

Sperm DNA Fragmentation Assay (SDFA™)檢查
可檢驗不正常精蟲
高達20%男性顯示不正常SDFA精蟲
綠色marker顯示正常 DNA精蟲
橘色marker顯示不正常DNA片段精蟲

One method to test for broken DNA (fragmentation) inside the sperm is to use the fluorescent dye acridine orange to paint sperm with normal DNA green and those with broken DNA a bright orange-red color. The photo on the right shows that routine microscopic evaluation cannot show the difference and that the dye is necessary to expose sperm with broken DNA.

http://lomalindahealth.org/health-care/our-services/fertility/conditions-and-treatments/andrology-tour.page

eosin‐nigrosin染色法可簡單有效評估精蟲存活

本研究介紹簡單有效評估精蟲活動能力之方法: 單一步驟eosin‐nigrosin染色法
eosin‐nigrosin組成為: 0.67% eosin + 10% nigrosin 
染色時間為30 s
其評估精蟲存活律之準確率高達90%

Sperm undergo a maturation process to tightly pack the DNA inside the head and incomplete packing leads to infertility. Mature sperm can be distinguished from immature sperm using the acidic aniline blue eosin stain. Immature sperm are stained dark blue in contrast to the red mature sperm. The two colors can be explained by the difference in the type of amino acids found in the mature versus the immature sperm.








http://lomalindahealth.org/health-care/our-services/fertility/conditions-and-treatments/andrology-tour.page

玻尿酸結合測試與精蟲穿透測試並無明顯關聯

研究顯示玻尿酸結合測試 Hyaluronan binding assay (HBA) 與精蟲穿透測試sperm penetration assay (SPA)並無明顯關聯‧

HBA與SPA應用於男性不孕症各有其專屬性，並無法個別取代

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2868308/

hyaluronic acid binding 與傳統ICSI之比較

1. Hyaluronic acid binding 可篩選出品質較佳之精蟲, 包括較佳之精蟲蛋白組成，較少的DNA缺損 及外型較正常, 較高之受孕率
2. 但著床率及懷孕率與傳統ICSI並無明顯差異

sperm penetration assay (SPA)精蟲穿透測試

將精蟲置於倉鼠卵子中
經過12小時培養
觀察精蟲有無穿透卵子
>10% 正常
<10% 異常
異常不代表精蟲無法穿越人類卵子細胞

The capacity of each sperm to penetrate the egg membrane and unpack the tightly-coiled DNA found in its head can be assessed with the SPA or sperm penetration assay. Inactive thawed hamster eggs are used in this assay. The number of decondensed sperm heads in each egg is counted as shown in this photo on the left (arrows at 2 of the many heads). The DNA in each head is visible as a green circle under fluorescence microscopy shown on the right. Patients with low egg penetration may need sperm injection during IVF to overcome penetration problems.

http://lomalindahealth.org/health-care/our-services/fertility/conditions-and-treatments/andrology-tour.page

Elonva與傳統排卵針之懷孕率相同

新一代長效誘導排卵針Corifollitropin alfa (Elonva®)
於月經第2天施打，約可持續作用9天後，約再施打2天短效傳統排卵針後可達卵泡成熟及取卵
本篇指出Elonva與傳統排卵針之懷孕率相同‧

cryoloop冷凍之使用方法

http://humrep.oxfordjournals.org/content/16/9/1965.full
本篇詳列cryoloop冷凍之使用方法
其cryoprotectant 濃度略高於人類使用之抗凍劑
其balance timing 亦較短
本篇發表於2004年是目前發展成熟的cryotop方法的前身

雷射輔助精蟲顯微注射並不顯著優於傳統精蟲顯微注射

1. 雷射輔助精蟲顯微注射: 先以雷射把中空透明帶打出一個洞再施行精蟲顯微注射(ICSI)

2. 優點: 減少卵子在ICSI過程之擠壓變形傷害

3. 缺點: 暴露時間較長，中空透明帶打出一個洞可能造成中空透明帶對卵子保護性出現缺口

4. 本研究顯示雷射輔助精蟲顯微注射並不顯著優於傳統精蟲顯微注射

5. 雷射輔助精蟲顯微注射可能只對特殊卵子(過熟，老化，難以穿透，過脆卵子，反覆失敗之ICSI患者)有幫助，對一般卵子ICSI並無特殊益處

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1550249/?tool=pmcentrez

Polscope可偵測避免ICSI傷害紡錘體

   

Polscope: 

1. 原本使用於複製動物上，可偵測紡錘體位置 藉以去除卵子細胞核及染色體

2. 傳統精蟲顯微注射(ICSI)是根據極體(polar body,PN)判斷紡錘體可能位置

3. 研究顯示 高達2/3的紡錘體並不緊臨PN

4. 使用Polscope可偵測出紡錘體位置 避免ICSI過程傷害卵子紡錘體

5. 使用Polscope可提高受孕胚胎之品質達1/3以上

新一代排卵針corifollitropin alfa

新一代排卵針corifollitropin alfa
於月經第2天施打一劑即可
研究顯示其重複使用並不會造成免疫性抗體 間接證實其安全性

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3137390/?tool=pubmed

試管嬰兒療程中抽血驗賀爾蒙濃度是常規性檢查
本研究以冷凍胚胎之植入療程中，於胚胎植入前3天抽血驗E2(雌激素)濃度，顯示E2濃度並無法預測其與子宮內膜厚度及植入後懷孕率之關聯
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2467429/

卵巢組織切片玻璃化冷凍可完善保存於冷凍小管

卵巢組織切片玻璃化冷凍可完善保存於封閉式冷凍小管，亦可防止汙染之狀況‧

卵子細胞顯現玻璃化冷凍對卵子細胞的傷害性並不明顯

溫和刺激排卵之試管嬰兒誘導排卵法(自然療法)之優缺點

月經第5天開始打排卵針,每天打150IU或月經第2-3天開始打排卵針,每天打100IU
月經第10-12天開始打腦下垂體拮抗劑(GnRH antagonist)
取卵數通常少於8顆
優點:
打針較少 藥費較低
卵巢過度刺激較少
卵子品質可能較優
子宮內膜接受度較好
主要缺點為
1. 活產率較低 ，較傳統試管嬰兒下降約10-20%
2. 節省藥費有限, 病患寄望的是較高的懷孕率而非節省1-2萬元藥費
3. 通常無多餘的胚胎可供冷凍

抽菸不僅危及本身之健康亦可能造成下一代生殖能力下降

孕婦於懷孕早期抽菸容易引發胚胎生殖細胞減少
造成下一代生殖能力受損
因此抽菸不僅危及本身之健康亦可能造成下一代生殖能力下降

http://humrep.oxfordjournals.org/content/25/11/2755.long

Anti-Mullerian hormone(抗穆氏管荷爾蒙)與誘導排卵之關聯性

研究顯示AMH會隨施打排卵針而下降
至排卵針施打當日AMH達最低
月經來3天內測AMH數值應更具代表性

人工受孕病患黃體期補充黃體素並不明顯提升懷孕率

研究顯示吃排卵藥&施行人工受孕的病患，黃體期補充黃體素並不明顯提升懷孕率

習慣性流產病患使用免疫球蛋白療法臨床效果似乎有限

習慣性流產病患使用免疫球蛋白療法(immunoglobulin)屬於常規&昂貴之療法
本篇指出習慣性流產病患使用免疫球蛋白療法臨床效果似乎有限
造成習慣性流產之潛在因素並無法使用immunoglobulin有效解除

http://humrep.oxfordjournals.org/content/25/9/2203.long

Intravenous immunoglobulin and idiopathic secondary recurrent miscarriage: a multicentered randomized placebo-controlled trial

Table II

Index pregnancy outcomes in women who received IVIG and in controls.

Outcome	IVIG group (n = 23)	Control group (n = 24)	OR (95% CI)*	P-value
Live birth rate	16/23 (70%)	15/24 (63%)	1.37 (0.41–4.61)	0.760
Live birth rate, excluding biochemical miscarriages	16/20 (80%)	15/20 (75%)	1.33 (0.30–5.93)	>0.999
Live birth rate, excluding miscarriages <6 weeks of gestation	16/17 (94%)	15/16 (94%)	1.07 (0.06–18.62)	>0.999

腫瘤化學治療對精蟲數量品質活動力及基因造成不良影響

白血病患者接受化療後精蟲DNA受損率及基因片段損傷程度增加

特定腫瘤化學治療可能會對精蟲數量品質活動力及基因造成不良影響

http://humrep.oxfordjournals.org/content/25/8/1877.long

由於冷凍技術之進步，目前觀念傾向於OHSS將胚胎冷凍後日後在重新植入

卵巢過度刺激(OHSS)屬於試管嬰兒'常見之併發症，
由於冷凍技術之進步，目前觀念傾向於OHSS將胚胎冷凍後日後在重新植入
本篇亦提出使用Dopamine agonists, e.g, Cabergoline 可減低OHSS之機率及嚴重度

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2868304/

以表觀遺傳學(epigenetics)觀點對精蟲顯微注射(ICSI)對試管嬰兒遺傳之影響

本篇提出表觀遺傳學(epigenetics)，對精蟲顯微注射(ICSI)後試管嬰兒遺傳之影響

父親的DNA密碼可能對胚胎基因的修飾，但並不會造成基因序列本身的改變。

基因外的修飾包括分子的增加，增加甲基群到基因骨架上。

進而改變基因的結構與外觀，因而影響基因與重要轉錄因子之交互作用

補充葉酸可防止胎兒神經管缺損, 亦有助於提高精蟲品質

本篇提出補充葉酸不僅可防止胎兒神經管缺損(NTD)
補充葉酸亦有助於提高男性精蟲品質，包括精蟲數量，活動力與減少精蟲畸型率‧

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3183498/

錘體形成之時間，分裂速度與紡錘體大小與胚胎品質與懷孕率有關

本篇使用Polscopy觀查卵子紡錘體
以ICSI後27hr分為裂為2-cell胚胎 區分為快速與慢速分裂組

快速組中的紡錘體形成紡錘體大小較速分裂組的紡錘體為大
結論: 錘體形成之時間，分裂速度與紡錘體大小與胚胎品質與懷孕率有關

www.springerlink.com/content/y58864831m746005/fulltext.html

子宮內膜異位對於基礎濾泡及優勢卵子數量並無顯著減少作用

1. 比較患有子宮內膜異位及未 患有 子宮內膜異位之卵巢卵子數量
2. 研究顯示子宮內膜異位對於基礎濾泡及優勢卵子數量並無顯著減少作用
3. 此結論暗示對於併有子宮內膜異位之不孕症病患，採用手術摘除治療應更保守謹慎


Fertil Steril. 2011 Feb;95(2):525-7. Epub 2010 Apr 7.

須先在37度溫度下置入抗凍劑中平衡後再冷凍

抗凍劑主要目的在保護卵子或胚胎細胞之紡錘體/染色體
本篇使用Polscopy觀查卵子紡錘體
強調須先在37度溫度下置入抗凍劑中平衡後再冷凍,
未事先置入抗凍劑平衡就下降溫度冷凍將造成紡錘體/染色體之損害
本篇提出於25度C下置入抗凍劑DMSO是危險的作法
本篇挑戰Kitazato protocol於25度C下置入抗凍劑平衡，再冷凍之傳統作法

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2951752/

誘導排卵反應不佳之高齡病患可考慮使用DHEA增加懷孕率及活產率

DHEA是卵泡生長所需荷爾蒙之必要物質
試管嬰兒病患誘導排卵反應不佳之高齡病患可考慮使用DHEA增加懷孕率及活產率
但DHEA並無法增加E2值及卵泡數量

 http://humrep.oxfordjournals.org/content/25/10/2496.long

Table IV

Comparison between the two groups for both treatment cycles.

Variables	DHEA (n= 26)	Control (n = 25)	P-value
Mean E2a on hCG (pg/ml)	732 ± 337	917 ± 487	0.2
Mean E2 per retrieved oocyte (pg/ml)	239 ± 120	335 ± 150	0.35
Mean progesterone on hCG (ng/ml)	0.8 ± 0.6	0.7 ± 0.4	0.71
Endometrial thickness on hCG (mm)	10.5 ± 2.5	10.8 ± 2.8	0.74
Mean number of retrieved oocytes	3.2 ± 1.6	3.5 ± 2.4	0.65
Fertilization rate (%)	58.20%	56.30%	0.42
Mean no. of embryo transfer	2.1 ± 1.0	2.2 ± 0.7	0.73
Mean scoring of leading embryo transfer	3.1 ± 0.5	3.3 ± 0.4	0.42
Clinical Pregnancy (%)	7 (26.9%)	3 (12.0%)	0.07
Live birth rate	6 (23.1%)	1 (4.0%)	0.05