去除囊胚blastocoele以進行玻璃化冷凍

囊胚期後期期形成之blastocoele可能對於玻璃化冷凍有不良影響
以29#針頭從3點極9點鐘推擠blastocoele使其排出後在置於抗凍液以進行下一步玻璃化冷凍

解凍後植入懷孕率48%，著床率29%

http://humrep.oxfordjournals.org/content/18/1/137.long

精蟲差施行ICSI 後比精蟲正常施行ICSI懷孕率為低

精蟲差的病人施行ICSI 後懷孕率比精蟲正常的病人施行ICSI後懷孕率為低

原因可能在於精蟲差的病人施行ICSI可能挑選到有問題的精蟲機率較高，進而影響胚胎之著床率

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18582871

誘導排卵重要觀念

誘導排卵過程中，連續每日施打中低劑量FSH 75IU 比單獨施打一高劑量375IU
更能達到誘導排卵之效果

誘導排卵過程中，施打FSH劑量不可下降過快造成體內FSH濃度下降過快，對生長中卵泡造成不利影響，甚至 atresia

GnRH agonist flare-up 容易造成卵巢過大水瘤之產生


自然周期療法之試管嬰兒懷孕率仍舊偏低(<20%)


clomid+FSH+GnRHantagonist在溫和誘導排卵過程可達到類似Long protocol+FSH之懷孕率

Clomid缺點: 耗損子宮內膜estrogen receptor

FSH施打劑量過高或血清，E2濃度過高，OHSS可能對卵子染色體與胚胎著床率產生不良影響

低劑量，較溫和之誘導排卵將是未來IVF誘導排卵之主流

http://humupd.oxfordjournals.org/content/15/1/13.full

施打hCG破卵針時優質卵泡應大於1.4cm

施打hCG破卵針時，優質卵泡大小應>1.4cm,
卵泡大小<1.4cm, 通常無法順利以人工受孕方式懷孕著床

http://humrep.oxfordjournals.org/content/20/3/756.full

胚胎施行輔助孵化後再玻璃化冷凍，可能提高冷凍胚胎懷孕率

囊胚期胚胎玻璃化冷凍存活率90%，懷孕率40%

囊胚期胚胎施行輔助孵化後再玻璃化冷凍，可能可提高冷凍胚胎懷孕率

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2757025/

Cryotip比Cryotop更有效於保存老鼠胚葉細胞

封閉系統之Cryotip (Irvine Scientific) vs. 開放系統之Cryotop (Kitazato)

Cryotip比Cryotop更有效於保存老鼠胚葉細胞

https://docs.google.com/file/d/0B2vmd2XYXiPATVkzUVA1SkRjejQ/edit

羊膜分離之幹細胞可以玻璃化冷凍有效保存

羊膜分離之幹細胞可以玻璃化冷凍有效保存(84%)

http://humrep.oxfordjournals.org/content/23/8/1760.full

目前所有分離精蟲方法均無法完全排除有基因缺陷之精蟲

目前所有分離精蟲方法: swim-up, grading, hyaluronic acid-binding, 外觀形態, etc
均無法完全排除有基因缺陷之精蟲用於ICSI

http://www.andrologyjournal.org/cgi/content/full/32/4/356

LH 補充對晚期濾泡期效果大於早期濾泡期

誘導排卵之過程機轉相當複雜，仍無法完全由two-cell two-gonadotrophin model解釋


LH於誘導排卵過程扮演角色仍具爭議

LH 補充對晚期濾泡期效果大於早期濾泡期
(LH is more effective in late follicular phase compare to early follicular phase)

LH 補充可用r-LH, HMG, hCG

http://humrep.oxfordjournals.org/content/16/4/803.2.full

冷凍解凍過程傷害胚胎原因包括: 冰晶傷害，冷凍解凍液毒性傷害，滲透壓，溫度, etc

以老鼠囊胚為模型，可分析冷凍解凍過程是否有任何環節問題傷害胚胎
形成原因包括: 冰晶傷害，冷凍解凍液毒性&傷害，滲透壓，溫度, etc

http://humrep.oxfordjournals.org/content/17/7/1863.full

用雙層毛細管儲存胚胎以避免冷凍過程病毒汙染

用雙層毛細管儲存胚胎以避免冷凍過程病毒汙染
缺點: 冷凍降溫較慢

http://humrep.oxfordjournals.org/content/20/2/492.full

卵子中空透明帶可篩除染色體異常之精蟲

卵子中空透明帶ZP可篩除染色體異常之精蟲
-----除非精蟲很差，儘量使用IVF


swim-up vs. grading 精蟲處理方式比較
-----grading 精蟲染色體異常比例較高


http://humrep.oxfordjournals.org/content/15/7/1529.full

尿液提煉vs.基因合成hCG: 二者IVF懷孕率相似

尿液提煉hCG vs. 基因合成hCG

二者臨床IVF懷孕率相似，無統計差異

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21491386

精蟲DNA fragment 比例越高，胚胎品質越差懷孕率越低

精蟲DNA fragment 比例越高，胚胎品質越差，懷孕率越低

精蟲ㄕㄨ　ˋDNA fragment 比例越高，

精蟲DNA fragment 比例>20%，卵子無法正常受孕

IVF過程可篩除DNA fragment 比例過高之精蟲

http://humrep.oxfordjournals.org/content/18/5/1023.abstract?ijkey=8e59a12d09aab2b83b6e4adb28020063b49fa132&keytype2=tf_ipsecsha

極體與原核平面夾角越小胚胎品質越佳

a 角度: 原核平面與較近極體之最小夾角
b 角度: 原核平面與較遠極體之最小夾角

a角度與胚胎品質無統計關連(但alpha 角度越小可能胚胎品質越佳)
b角度越小，胚胎品質越佳

g角度與胚胎品質無關連

極體與原核平面夾角越小胚胎品質越佳
ICSI受孕之胚胎碎片fragment似乎比IVF受孕之胚胎碎片fragment為多

http://humrep.oxfordjournals.org/content/14/10/2588.full

單獨第2或第3天胚胎評估即可準確預估胚胎之品質

單獨第2或第3天胚胎評估即可準確預估胚胎之品質

第1天胚胎評估之準確性最低，
第2天胚葉細胞數目準確性>胚葉細胞大小一致性準確性>胚胎細胞碎片準確性

http://humrep.oxfordjournals.org/content/24/9/2104.full

歐洲統計試管嬰兒懷孕率約30% 人工受孕懷孕率約12%

2005全歐洲統計
試管嬰兒懷孕率(每次植入)約30%
人工受孕懷孕率(<40y)約12%
人工受孕懷孕率(>40y)約12%

http://humrep.oxfordjournals.org/content/24/6/1267.full

Day 1, 2胚胎形態並無法有效評估胚胎之囊胚發育率

Day 1(IVF-IVF後18h)---評估2PN

早期分裂(early cleavage)---ICSI後26h有分裂為2-cell 屬於早期分裂(early cleavage)

Day2 (IVF-ICSI後44h)---評估胚葉細胞數目(4 cells)優於> or <4celll

Day 2胚胎形態中，胚葉細胞數目(4 cells) & early cleavage 比細胞碎片fragment (<50%)更有效評估胚胎之囊胚發育率

Day 1, 2胚胎形態並無法有效評估胚胎之囊胚發育率

http://humrep.oxfordjournals.org/content/22/7/1973.full

黃體期補充雌激素對IVF懷孕率並無明顯助益

黃體期補充雌激素對於GnRH antagonist+IVF療程之懷孕率並無明顯助益

http://humrep.oxfordjournals.org/content/21/10/2628.long

未來誘導排卵(COH)趨勢

未來誘導排卵之趨勢為
排卵針劑越用越少
卵子數量越來越少
植入胚胎數量越來越少
療程縮短
降低用藥複雜度
外用口服藥取代針劑
GnRHantagonist結合溫和刺激之誘導排卵取代長療程GnRHagonist

http://humrep.oxfordjournals.org/content/25/11/2678.full

D7-11施打FSH比D2-6施打FSH可得較高懷孕率

(A)D2-6每天施打FSH 112iu   vs. (B)D7-11每天施打FSH 112iu
結論:
D7-11比D2-6可得較高之懷孕率& E2
2組卵泡數量類似
誘導排卵中期以後應小心避免下降FSH劑量太快或施予過高estrogen導致feedback抑制endogenous FSH, 造成卵泡終止發育

http://humrep.oxfordjournals.org/content/21/11/2941.full

軟植入管懷孕率高於硬植入管

軟植入管懷孕率(Labotect 39.4%, Wallace 41.4%) 高於硬植入管(Frydman 24.2%, TDT 31.4%)

http://medind.nic.in/jaq/t05/i2/jaqt05i2p146.pdf

hMG誘導排卵造成較高FSH, E2, hCG, androgen濃度進而影響卵泡生長品質

使用hMG於誘導排卵可能可造成卵泡液或血清較高的FSH, E2, hCG, androgen濃度
進而影響卵泡生長與品質‧

http://humrep.oxfordjournals.org/content/22/3/676.full

服用避孕藥一段時間後，AMH與FSH數值會下降

服用避孕藥一段時間後，基礎AMH與FSH數值會下降
AMH由卵子顆粒細胞granulosa cell製造

http://humrep.oxfordjournals.org/content/22/12/3192.full

Trophectoderm可用於胚胎植入前基因檢驗

 trophectoderm (TE) 與 inner cell mass (ICM)均可用於胚胎植入前基因檢驗(PGD)

使用基因晶片microarray molecular karyotyping

其基因或染色體吻合度相當高 (96%)
TE因較不會傷及胚胎更具優勢


http://molehr.oxfordjournals.org/content/16/12/944.full

誘導排卵過程輔助施打hCG 50iu/d可加速FSH效率加速卵泡成熟

誘導排卵COH過程中除施打FSH，輔助施打hCG 50iu/d，
可能加速FSH效率，加速卵泡成熟，減少FSH劑量，
LH對COH主要作用在濾泡期中後期
LH刺激theca cell之LH receptor

http://jcem.endojournals.org/content/84/8/2659.long

HMG誘導排卵有助於減少排卵針劑量與時間

誘導排卵過程中添加LH (HMG)有助於減少誘導排卵之排卵針劑量與時間

http://jcem.endojournals.org/content/86/1/337.full

卵泡成長到晚期添加HMG或LH有助於提高懷孕率

卵泡成長到晚期(>1.4cm)添加HMG或LH有助於提高懷孕率

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=Commenges%E2%80%90Ducos%20M%2C%20Piault%20S%2C%20Papax

FSH抑制卵泡細胞之自我衰亡

FSH刺激granulosa cell
LH刺激thecal cell

單獨添加FSH即可促進卵泡生長
FSH抑制granulosa cell之自我衰亡apoptosis,
添加LH對於卵泡生長並無助益

http://molehr.oxfordjournals.org/content/14/2/75.full

領先濾泡達2.cm以上再施打hCG可達更高AIH懷孕率

使用clomiphene citrate (CC)或 letrozole於人工受精之誘導排卵
其結果並無明顯差異


領先濾泡達2.3-2.8cm再施打hCG可達更高懷孕率


施打hCG時機選擇除考量領先濾泡大小亦須考慮子宮內膜厚度


http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22459633

卵子冷凍解凍存活率約80%

卵子冷凍解凍存活率約80%
Open system 仍是胚胎玻璃化冷凍之主流

http://humrep.oxfordjournals.org/content/25/5/1192.full

卵子捐贈可冷凍日後解凍而達到與新鮮卵子類似懷孕率

卵子捐贈可先冷凍，日後解凍後受孕植入
可達到與新鮮卵子類似懷孕率

如此不需調控卵子捐贈者與受贈者之月經周期即可執行試管植入

http://humrep.oxfordjournals.org/content/26/4/782.full

原核胚胎細胞質月暈現象及核仁數目可有效預測胚胎著床率

以原核胚胎之6項指標可以有效預測胚胎之著床率與懷孕率
6項指標包括:
proximity of the PN, 
orientation of the PN with respect to the polar bodies, 
centring of the two PN, 
cytoplasmic halo, 
number of nucleolar precursor bodies (NPB), 
polarization of the NPB. 
其中影響較明顯為

cytoplasmic halo(細胞質月暈現象), 
number of NPB(原核核仁數目), 


http://humrep.oxfordjournals.org/content/21/1/234.full

cryoloop冷凍囊胚植入懷孕率約37%

使用cryoloop冷凍解凍囊胚期胚胎存活率約80%
植入懷孕率約37%
第5天囊胚之冷凍解凍存活率較第6天囊胚為高
流產率約20%


http://humrep.oxfordjournals.org/content/18/2/384.full

施打hCG當天過高progesterone對懷孕率有不良影響

施打hCG當天過高progesterone 濃度對懷孕率有不良影響
這類病患可用FET改善其不良影響

http://www.blogger.com/blogger.g?blogID=3292248313967719465#editor/target=post;postID=3498997766856943138

IVF精蟲融合與極體排出圖解

IVF精蟲融合與極體排出圖解

http://www.ehd.org/virtual-human-embryo/figure.php?stage=1

冷凍保存成功率 (高到低): Day5, Day1, Day3, Day2胚胎

不成熟卵子冷凍保存成功率較高

冷凍保存成功率: Day5>Day1>Day3>Day2胚胎

http://www.reproduction-online.org/content/141/1/1.full

GnRH antagonist每日最適劑量為0.25 mg

GnRH antagonist每日最適劑量為0.25 mg
過高或過低GnRH antagonist劑量會造成LH或progesterone壓制過度或不足

http://humrep.oxfordjournals.org/content/20/2/359.full

卵泡細胞之生長從原始卵子到成熟需3個月的時間

卵泡細胞之生長從原始卵子到成熟需3個月的時間

FSH window: 濾泡期早期誘導排卵所需FSH最低劑量

http://edrv.endojournals.org/content/18/1/71.full

排卵針增加卵顆粒細胞不正常有絲分裂

排卵針會增加卵細胞granulosa cell之不正常有絲分裂
高齡婦女卵細胞granulosa cell不正常有絲分裂增加

http://jcem.endojournals.org/content/89/7/3270.full

ICSI後染色體重組速度較IVF染色體重組速度為慢

ICSI後精蟲染色體重組模式與IVF後精蟲染色體重組模式並不相同
ICSI後染色體重組速度較IVF染色體重組速度為慢


http://www.biolreprod.org/content/75/3/442.full