準備數個培養盤,使用受精培養液與培養油以備來採集卵子與進行卵子授精之用。每個病人準備一瓶濾泡沖洗緩衝液。ICSI 的病例須準備額外的培養油。將所有的培養盤與培養液等分管在37 oC 的6% CO2 大氣下平衡至次日。含HEPES 緩衝劑的培養液則臨用前才在37 oC 平衡。
精子培養液,精子緩衝液,卵子清洗緩衝液,進行
第0 天:
將精子梯度套組在室溫下進行平衡,以用於精子的製備。採集病人的卵子並進行人工授精。
進行ICSI 的病例:早上將PVP 取出,在37 oC 與6% CO2 下平衡6小時。將玻尿酸.取出,在37 oC 與6% CO2 下平衡6 小時。將ICSI 盤準備妥當,包括已平衡的卵子清洗緩衝液或胚胎分裂培養液、PVP 與培養油,進行ICSI 程序,並將注射過的卵子放回含胚胎分裂培養液的培養盤中培養。
準備:準備隔日要培養胚胎的培養盤,培養盤內含有以胚胎分裂培養液與培養油。所有的培養盤都須置於37 oC 與6% CO2下平衡至次日。
第+1 天:
在早上評估自然體外受精與ICSI 的卵子是否已有受精現象。徹底沖洗受精卵,並放進準備好的含胚胎分裂培養液的培養盤,置於37 oC 與6% CO2 下,進行隔夜培養。
準備:以準備含有胚胎分裂培養液與培養油的培養盤,以便用於胚胎的繼續培養。
36
第+2 天:
在早上評估胚胎是否已進行分裂。將胚胎沖洗後,置於含胚胎分裂培養液的培養盤中,於37 oC與6% CO2 下繼續培養。
準備:備妥含有胚胎分裂培養液的培養盤,以便用於胚胎移植。
第+3 天:
評估胚胎是否繼續分裂,並決定是否要進行移植、冷凍保存或繼續培養(第五天)。
若進行胚胎移植,則使用適合胚胎分裂期胚胎的冷凍保存套組將多餘的胚胎冷凍起來。
將欲繼續培養的胚胎在囊胚培養液中徹底沖洗,並放入準備的培養盤中,在37 oC 與6% CO2 下培養48 小時。
第+4 天:
勿擾動胚胎。
準備:備妥含有囊胚培養液的培養盤,用於囊胚的移植,在37 oC 與6% CO2 下,平衡至次日。
第+5 天:
在早上評估胚胎是否已發育進入囊胚期。選取1 或2 個囊胚進行移植。多餘的囊胚以囊胚冷凍保存套組冷凍起來。
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